導入
ベックマン DU640 UV/可視分光計
紫外可視分光法または紫外可視分光計は、紫外範囲 ( 200 nm ～ 400 nm )、可視光線、および近赤外( 750 nm ～ 1400 nm ) までの波長を持つ光子を含む分光技術です。この波長範囲の放射線を受けると、分子は電子遷移を起こします。この技術は、蛍光が励起状態から基底状態への遷移を伴うのに対し、吸収分光法は基底状態と励起状態の間の遷移を扱うという意味で、 蛍光分光法を補完します。
アプリケーション
紫外可視分光法は、遷移金属および高度に共役した有機化合物の溶液の定量的研究に日常的に使用される方法です。
- 遷移金属イオンの溶液は、金属イオン内の電子が、ある電子状態から別の電子状態に励起される可能性があるため、着色することができます (つまり、可視光を吸収します)。金属イオン溶液の色は、特定のアニオンやリガンドなどの他の種の存在に強く影響されます。したがって、硫酸銅の希薄溶液の色は非常に明るい青色です。アンモニアを添加すると色が強化され、吸収極大の波長(λ max ) が変更されます。
- 有機化合物、特に共役度が高い化合物は、 電磁スペクトルの可視領域および紫外領域も吸収します。分析に使用される溶媒は、たとえば、水に可溶な化合物には水、疎水性有機化合物にはエタノールです（有機溶媒は大きな UV 吸収を持つ可能性があります。したがって、すべての溶媒が UV 分光法に適しているわけではありません。エタノールはせいぜいほとんど吸収しません）波長）。溶媒の極性または酸性は、有機化合物の吸収スペクトルに影響を与える可能性があります。たとえば、チロシンでは、pH が 6 から 13 に増加するか、溶媒の極性が減少すると、その吸収極大とモル吸光係数が増加します。
- 電荷移動錯体も色の付いた溶液を生成しますが、これらの色は溶液が希釈されない限り、定量的な測定に使用するには強すぎる場合があります。
ランバート・ベールの法則は、溶液の吸光度はその濃度に正比例すると述べています。したがって、紫外可視分光法を使用してこの濃度を決定できます。この濃度での吸光度の変化を知る必要があります。これは、基準 (モル吸光係数の表) から、またはより正確には検量線を取得することによって行うことができます。
紫外可視分光光度計は、 HPLC の検出器として使用できます。分析対象物の存在により、濃度に比例すると考えられる応答が得られます。正確な結果を得るには、未知の溶液中の分析物に対する機器の応答を標準と比較する必要があります。これは、キャリブレーション ラインを使用するのと非常に似ています。特定の濃度に対する応答 (ピークの高さ) は、応答係数として知られています。